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β-半乳糖苷酶染色技术服务

简要描述:β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。

  • 更新时间:2026-03-21
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:1104

详细介绍

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实验步骤:

1.用 2 mL D-PBSA液洗涤细胞。

2.用 1 mL 固定液于室温下固定细胞 5 min。

3.用 2 mL D-PBSA洗涤细胞 2次。

4.将1mL 底物/染色液加入到每个培养子内 ,37℃孵音2h.

5.用 2 mL D-PBSA液冲洗每孔细胞,在倒置显微镜下观察细胞,计数蓝染( β-gal 阳性)细胞。

6.培养板的储存。在每孔加 1 mL 含 10%甲醛的缓冲盐溶液,室温下固定 10 min,然后用缓冲盐溶液洗涤细胞,4℃ 储存缓冲盐溶液。

一、原理

衰老细胞特异性表达溶酶体 β- 半乳糖苷酶,在 pH6 条件下可催化底物 X‑Gal 生成蓝绿色沉淀,以此标记衰老细胞。

二、染色结果

  • 衰老细胞:胞质呈蓝绿色 / 深蓝色

  • 正常细胞:基本不着色

三、适用样本

  • 细胞爬片

  • 组织冰冻切片(少数情况)

四、简要步骤

  1. PBS 洗涤

  2. 固定液固定 10–15 min

  3. PBS 洗净

  4. 加入染色工作液(含 X-Gal)

  5. 37℃ 恒温孵育过夜(12–16 h)

  6. PBS 洗涤,显微镜观察拍照




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