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transwell转移实验服务

简要描述：原理:常用8.0um，12.0um膜，上室种肿瘤细胞，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑，计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。

  • 更新时间：2026-03-20
  • 厂商性质：代理商
  • 访  问  量：1326
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一、基本原理

  • Transwell 小室：上层 + 下层，中间有多孔滤膜（8 μm 常用）

  • 迁移实验（Migration）：细胞主动穿过膜孔，从上层到下层

  • 侵袭实验（Invasion）：膜上包被Matrigel，模拟细胞穿过基底膜

  • 染色后计数穿膜细胞，反映转移能力

二、核心材料

  • Transwell 小室（24 孔板，8 μm 孔径）

  • Matrigel（仅侵袭实验用）

  • 无血清培养基

  • 含血清培养基（下室趋化）

  • 甲醇 / 多聚甲醛固定

  • 结晶紫染色

三、实验步骤（通用标准流程）

1. 铺胶（仅侵袭实验）

  • Matrigel 用无血清培养基1:8 稀释

  • 每孔上层加 50 μL

  • 37℃ 孵育 2–4 h 或过夜 使其凝固

2. 细胞处理

  • 胰mei消化，无血清培养基重悬

  • 计数，调整浓度：1×10⁵ 细胞 / 孔 左右

3. 加样

  • 上室：200 μL 细胞悬液（无血清）

  • 下室：600 μL 含 10% FBS 培养基（趋化）

4. 培养

  • 37℃ 培养

    • 迁移：12–24 h

    • 侵袭：24–48 h

5. 固定与染色

  • 取出小室，PBS 轻洗

  • 甲醇固定 15 min

  • 0.1% 结晶紫染色 15–20 min

  • 棉签轻轻擦掉上室未穿膜细胞

6. 拍照计数

  • 随机取 5 个视野（×100 或 ×200）

  • ImageJ 计数细胞数，计算平均值

四、结果判断

  • 穿膜细胞越多 → 迁移 / 侵袭能力越强

  • 给药组 vs 模型组：细胞数显著减少 → 抑制转移


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