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细胞周期检测实验服务

简要描述:细胞周期是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期,停止细胞分裂,执行一定生物学功能(G0期)。

  • 更新时间:2026-03-20
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:1029

详细介绍

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一、实验原理

用 **PI(碘化丙啶)** 嵌入 DNA 双链,荧光强度与 DNA 含量成正比,根据 DNA 含量将细胞分为:
  • G0/G1 期:二倍体,2N

  • S 期:DNA 复制期

  • G2/M 期:四倍体,4N


二、主要试剂

  • PI 染色液(含 RNase A)

  • 70% 乙醇(-20℃预冷)

  • PBS

  • 流式细胞仪


三、标准实验步骤(可直接照做)

1. 细胞收集

  • 弃培养基,PBS 洗 1 次

  • yi酶消化,终止,吹打成单细胞悬液

  • 离心:1000 rpm × 5 min,弃上清

2. 固定(关键)

  • 缓慢加入 **-20℃预冷 70% 乙醇 **

  • 边加边轻轻吹打,防止成团

  • 4℃固定过夜(最少 2 h)

3. 洗涤去乙醇

  • 离心弃乙醇

  • PBS 重悬洗涤 1~2 次

4. PI 染色

  • 弃上清,加入PI 染液(含 RNase)

  • 37℃避光孵育 30 min

5. 上机检测

  • 流式上机,FL2 通道收集信号

  • FlowJo / 配套软件分析周期各期比例


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