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G0/G1 期:二倍体,2N
S 期:DNA 复制期
G2/M 期:四倍体,4N
PI 染色液(含 RNase A)
70% 乙醇(-20℃预冷)
PBS
流式细胞仪
弃培养基,PBS 洗 1 次
yi酶消化,终止,吹打成单细胞悬液
离心:1000 rpm × 5 min,弃上清
缓慢加入 **-20℃预冷 70% 乙醇 **
边加边轻轻吹打,防止成团
4℃固定过夜(最少 2 h)
离心弃乙醇
PBS 重悬洗涤 1~2 次
弃上清,加入PI 染液(含 RNase)
37℃避光孵育 30 min
流式上机,FL2 通道收集信号
FlowJo / 配套软件分析周期各期比例
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