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哮喘模型构建方法如下:
1. 明矾致敏佐剂制备:10%明矾溶液2ml与500ug/ml OVA2ml等量混合后,用NAOH调PH值为6.5,室温孵育60min,750r/min,离心5min,去掉上清液,重溶于2ml PBS。致敏时每只小鼠腹腔注射200ul,其中含2mg明矾和100ug OVA。
2. 致敏:小鼠分别于第0、14天时腹腔注射明矾致敏佐剂0.2ml,对照组注射相同剂量的PBS溶液,正常饮食饲养。
3. 激发:雾化吸入,第21天时小鼠放入有机玻璃箱,5% OVA雾化吸入,每天30min,共7d,最后一次致敏后24h内检测。
小鼠:BALB/c 小鼠(6–8 周,雌性更常用)
大鼠:SD / Wistar(较少用,机制研究多用小鼠)
OVA(卵清蛋白):致敏与激发抗原
氢氧hua铝凝胶(Al (OH)₃):佐剂,增强免疫反应
生理盐水
混合液:
OVA 100 μg + Al (OH)₃ 2 mg / 只
用生理盐水配至 0.2 mL / 只
腹腔注射,每 7 天一次,共 3 次
5% OVA 生理盐水溶液
雾化吸入 30 min / 天,连续 3 天
对照组:同等流程,用生理盐水替代 OVA
末次激发后 24–48 h 取材
此时气道炎症、黏液高分泌最典型
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